文题释义:
透明质酸:由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖二糖单元构成,是一种亲水性很强的内源性非硫酸化糖胺聚糖,参与细胞迁移、分化及增殖,作为天然高分子材料已在生物医学领域普遍应用。
国产多孔钽:是由华北理工大学与重庆润泽医疗器械有限公司及多家科研机构合作,完成了技术的创新突破,共同研发出的具有中国独立产权的多孔钽材料。国产多孔钽材料采用高温煅烧技术制备,具有立体的三维空间结构,孔径达400-600 μm,孔隙率达75%-85%,具备特有的相互连通的微孔结构和更良好的渗透性以及良好的力学性能及抗压强度(100-170 MPa),弹性模量在2.0-4.0 GPa,介于骨皮质和骨松质之间,完全符合软骨修复的力学强度。与传统的同种异体骨、不锈钢及金属钛等医用材料相比,国产多孔钽具有良好的生物相容性和成骨成软骨性能,已成为骨及软骨缺损修复的新型材料。
背景:支架材料与生物因子在不同条件下复合培养对软骨细胞功能的影响,是组织工程材料研究的热点。
目的:探讨动态环境下透明质酸与国产多孔钽复合对大鼠软骨细胞功能的影响。
方法:分离培养SD大鼠膝关节软骨细胞,分5组培养:A组单纯细胞静态培养;B组接种于国产钽片上静态培养;C组接种于国产钽片上,加入含透明质酸的培养基,静态培养;D组接种于国产钽片上,置于动态转瓶中(双向交替正反转,旋转角度为40°,40 r/h)培养;E组接种于国产钽片上,加入含透明质酸的培养基,置于动态转瓶中(双向交替正反转,旋转角度为40°,40 r/h)培养,5组均连续培养7 d。扫描电镜下观察材料上的细胞形态,采用ELISA法检测细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、SOX9的分泌情况,Western Blot实验检测细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、SOX9蛋白的表达。
结果与结论:①扫描电镜下可见,随着静态培养时间的延长,C组软骨细胞数量逐渐增多,并逐渐覆盖钽材料表面;②培养第5天,C组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原分泌量均高于A、B组(P < 0.05),D组SOX9分泌量低于E组(P < 0.05),B组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原分泌量低于D组(P < 0.05),C组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原分泌量低于E组(P < 0.05);③培养第5天,C组Ⅱ型胶原蛋白表达量高于B组(P < 0.05),D组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白表达量高于B组(P < 0.05),E组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白表达量高于C组(P < 0.05);④结果表明,国产多孔钽与透明质酸复合后可促进软骨细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原的分泌和蛋白表达,动态环境培养下蛋白聚糖、Ⅱ型胶原的分泌及蛋白表达优于静态环境培养,SOX9的分泌及蛋白表达不受动、静态培养环境影响。
https://orcid.org/0000-0001-8647-4300 (张辉)
中国组织工程研究杂志出版内容重点:生物材料;骨生物材料;口腔生物材料;纳米材料;缓释材料;材料相容性;组织工程
关键词: 国产多孔钽, 透明质酸, 动态环境, 软骨细胞, Ⅱ型胶原, 蛋白聚糖, SOX9
引用本文: 张 辉, 王佳洋, 王 茜, 甘洪全, 王志强. 动态培养环境下透明质酸与国产多孔钽复合对软骨细胞功能的影响[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(3): 339-345.
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