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半固体培养基
semi-solid medium
定义:只加入少量凝固剂而维持一定形状,便于观察微生物运动或某些特定性状的机械强度较小的培养基。
学科:微生物学_微生物学技术
相关名词:培养基 凝固剂 琼脂 厌氧菌 鞭毛 噬菌体
图片来源:视觉中国
【延伸阅读】
培养基是由人工配制、适合微生物生长繁殖或代谢物产生的混合营养基质。如果按培养基外观的物理状态作分类,可将培养基分为液体培养基、固体培养基及半固体培养基,其中半固体培养基指在液体培养基中加入少量的凝固剂,而使之形成硬度较低的半固体状态的培养基。半固体培养基以琼脂为凝固剂,浓度一般控制在0.3%~0.7%,此时培养基在小型容器中倒置时不会流出,但在剧烈振荡后则呈破散状态。
半固体培养基常用于微好氧菌、厌氧菌的培养、分离,细菌运动性及趋化性的观察,噬菌体效价测定等实验中。在进行厌氧菌培养时,常采用高层琼脂柱法,将含有还原剂的半固体培养基装入试管中,经灭菌后,除表层尚有一些溶解氧外,越是深层其氧化还原电位越低,厌氧菌接入后会在半固体培养基的合适位置进行生长。
观察细菌运动性时,一般使用半固体琼脂穿刺法,即配制半固体培养基倒入试管中,灭菌后将试管直立,形成放倒试管不流动,而在手上轻轻敲打时琼脂破裂的半固体琼脂柱。使用接种针蘸取菌体,沿轴心穿刺接种于半固体培养基中,经过培养后,如细菌只生长在穿刺线上,则表示试验菌无运动性;如细菌由穿刺线向四周呈云雾状扩散,则表示试验菌有鞭毛,具有运动性。
进行噬菌体效价测定时,用双层平板法通过计量噬菌斑数量而计算噬菌体效价。在实验中底层平板为正常的固体培养基,可弥补培养皿底部不平的缺陷,有助于噬菌斑位于同一平面无交叠现象;而上层平板则为半固体培养基,有助于形成形态较大、特征明显、便于观察和计数的噬菌斑。