离子交换层析

ion exchange chromatography，IEC

定义：固定相是离子交换剂的层析分离技术。样品中待分离的溶质离子，与固定相上所结合的离子交换，不同的溶质离子与离子交换剂上离子化的基团的亲和力和结合条件不同，洗脱液流过时，样品中的离子按结合力的弱强先后洗脱。在生物化学和分子生物学领域此法常用于分离蛋白质、核酸等生物大分子。

学科：生物化学与分子生物学_方法与技术

相关名词：层析 离子交换剂 固定相 流动相 纯化

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【延伸阅读】

离子交换层析是常用的层析方法之一。它是在以离子交换剂为固定相、液体为流动相的系统中进行的。此法广泛应用于很多生化物质（例如：氨基酸、多肽、蛋白质、糖类、核苷酸和有机酸等）的分析、制备、纯化，以及溶液的中和、脱色等方面。离子交换层析之所以能成功地把各种无机离子、有机离子或生命大分子物质分开，其主要依据是离子交换剂对各种离子或离子化合物有不同结合力，其结合力的大小是由离子交换剂的选择性决定的。

离子交换剂是由载体、电荷基团（或功能基团）和反离子构成的。它在水中呈不溶解状态，能释放出反离子。当样品溶液与离子交换剂接触后，离子交换剂与待分离的离子或离子化合物相互结合，结合后其本身的理化性质仍保持不变。离子交换剂应满足下列要求：

1.有高度的不溶性，即在各种溶剂中进行交换反应时，交换剂都能保持一定形状；

2.有疏松的多孔结构或巨大的比表面积，使交换离子在交换剂中自由扩散和交换；

3.有较多的交换基团；

4.有稳定的物理化学性质，在使用过程中，交换剂不能因物理或化学因子的变化而变化。

根据离子交换剂中载体的组成和性质，可将其分成两大类：疏水性离子交换剂和亲水性离子交换剂。疏水性离子交换剂有阳离子交换树脂、阴离子交换树脂和螯合型离子交换树脂。常用的亲水性离子交换剂有纤维素、交联纤维素、交联葡聚糖和交联琼脂糖等。任何一种离子交换剂都不可能适用于分离所有的样品物质，因此，选择理想的离子交换剂势在必行，同时也是提高有效成分收得率和分辨率的一个重要环节。

离子交换层析的一般步骤为：1.选择离子交换剂，确定层析条件；2.离子交换剂预处理、装柱；3.离子交换柱平衡；4.上样；5.洗脱杂质；6.洗脱目的产物；7.柱再生。