高速逆流色谱法
high speed coutercurrent chromatography
定义:一种液–液分配色谱,将螺旋管的方向性与高速行星式运动相结合,产生一种独特的流体力学现象,使两相溶剂在螺旋管中实现高效接触、混合、分配和传递。与传统的液相色谱法比较,它具有分离效率高、溶剂用量少、无吸附、样品回收率高、重现性好和适用范围广等优点,避免了样品在固体载体上的不可逆吸附,特别适用于高黏度物质。
学科:药学_药物分析
相关名词:分配色谱法 固定相 流动性 分离 纯化
图片来源:视觉中国
【延伸阅读】
高速逆流色谱法是20世纪80年代初美国国立卫生院发明的一种逆流色谱技术,是一种不用固态支撑体或载体的液–液分配色谱法。高速逆流色谱采用的是单向流体动力学平衡原理。在内径约1.6mm的细管绕成的螺旋管柱里,互不相溶的两相溶剂能在重力场的作用下形成分段状态。恒流泵输送载着样品的流动相穿过固定相,在螺旋管的高速转动下两相就会沿螺旋管纵向分开,由于不同的物质在两相中具有不同的分配系数,在柱中的移动速度也不同,从而使样品得到有效的分离。
高速逆流色谱法主要优点有:1.螺旋管中固定相不需要载体,避免了液—固色谱中由于使用载体而带来的吸附现象,特别适用于分离极性物质和具有生物活性的物质;2.进样量较多,适用于制备性的分离;3.采用高速旋转的填料床,可以在短时间内完成样品的分离纯化,提高了效率。需要注意的是,在实际操作中,高速逆流色谱法需要严格的实验条件,如需对流动相的组成、流速、温度、压力等参数进行精确调控,才能达到最佳的分离效果,增加了实验的操作难度和复杂度,对于实验操作人员的要求较高。
高速逆流色谱法在天然产物、抗生素、食品、无机物等物质的分离与纯化领域被广泛应用,并在天然产物的研究开发方面显示出强大的优势。天然产物中成分复杂,高速逆流色谱法可以快速高效地分离纯化天然产物得到单体化合物。药物分析需要对药物成分进行分离和鉴定,高速逆流色谱法可以快速分析药物中的多种成分,提高分析效率。蛋白质是生物体内重要的生物分子,需要通过分离纯化才能得到单一蛋白质,高速逆流色谱法可以快速高效地分离纯化蛋白质,为蛋白质组学研究提供支持。化学合成过程中需要制备高纯度的中间体,可以利用高速逆流色谱法快速高效地纯化中间体,提高合成效率。处理环境样品时,环境样品中多种物质共存,需要进行分离纯化才能进行深入分析,高速逆流色谱法可以快速高效地分离纯化环境样品中的有机物、重金属等物质。
今后,不断完善高速逆流色谱技术,并将其更好地与检测技术以及结构解析技术相结合,将是高速逆流色谱法研究的重点问题,这有赖于对新技术的进一步开发利用和科学研究的不断深入。