都说吃东西时，比吃出一条虫更可怕的是吃出半条虫。但其实，能看到虫子已经算是比较良心的了！比如咖啡和巧克力，里面的虫子碎片就超出我们的想象，只是我们不知道而已！（并且这还是合格的......）以美国的食品药品监督管理局的检测标准来看，平均每100g巧克力中的虫子碎片数量低于60个就算合格。那有人会想，还好我不爱吃巧克力，也不爱喝咖啡。那你......逃得过茶吗？最近一项发表于《生物学通讯》（Biology Letters）的研究发现，在绿茶茶包中竟然隐藏了400多种昆虫的DNA！！这是茶的品质问题，还是“在所难免”谁也躲不过的冷门日常呢？
这篇研究中对茶包进行的检测名为环境DNA（environmental DNA, eDNA）检测，检测的对象是从该茶包中直接提取到的所有DNA，随后通过一些分子生物学的手段，获得这些DNA的序列信息，并将得到的DNA片段与已知物种信息的数据库比对分析，就可以鉴定出它们所属的物种分类信息。基于二代测序技术的eDNA检测
首先可以放心的是，茶包里存在昆虫DNA并不等于茶里就有这些虫子的碎片。其实这些昆虫仅仅在叶片上小憩一会，就有可能会留下自己的DNA。就像人走在路上，可能在流汗、脱发或者触摸周围环境的时候都会留下大量的人体DNA。
根据统计一个人平均每小时会脱落大约2*107个皮肤细胞，每个细胞都包含了超乎想象数量的DNA片段。所以即使只是一只小小的昆虫，一生中也在不断将富含 DNA片段的外骨骼、分泌液，甚至粪便散落在它生活的地方。因此，茶包里检测到的DNA，只能证明该DNA的主人曾经出现在这个环境中，但不表示它现在依然在这个茶包里。就好比凶案现场发现了凶手的DNA，但凶手不可能还老老实实蹲守在现场一样。既然测了也不能说明茶包里真的存在这些昆虫，那么科学家为什么要对这些茶包进行检测呢？这其实涉及到eDNA检测的真正用处——通过环境采样发现生物生活的痕迹。
该研究团队本来想要探寻当地种植地区中的昆虫生态，因此努力地在野外各个点采集样品进行eDNA的提取。但可惜的是，他们发现存在于野外的DNA碎片，很容易被紫外线分解或是被雨水冲刷掉。Mieke van der Heyde女士收集样品进行eDNA分析
相比之下，在干燥和黑暗的环境中储存的样本，DNA碎片可以比较稳定地保存下来。但是哪里能找到这样的“量大质优”的样品呢？研究者突然想到了另一种储存在干燥、黑暗条件下的植物制品——茶。科学家们开始了新的尝试，相比在野外采集植物的样本，收集茶叶样品就容易太多，在商场里就可以随意挑选。最终他们挑选了三种市售茶叶，两种绿茶（Camellia sinensis）和一种蒲公英茶（Taraxacum sp.）。与典型的 eDNA 样本提取不同，他们没有通过传统的手段——反复清洗茶叶，并从中过滤出DNA颗粒，而是直接以粉碎的茶叶作为对象直接提取DNA。因此提出的DNA除了茶叶表面可能存在的节肢动物，还有植物本身以及土壤中可能存在的真菌等杂质的DNA。茶包中节肢动物DNA序列聚类分析
不出科学家所料，他们在茶叶样本中顺利地获取了大量的DNA，再针对其中节肢动物的DNA进行解析和物种鉴定，最终发现仅仅在100毫克的茶样中，就识别出了约1000多种节肢动物的DNA痕迹。通过与薄荷、洋甘菊、欧芹等其他农作物样品间的对比还可以发现，茶叶中独有的昆虫DNA有1142种，丰度极高。当然对于平常人来说，这件事也意味另一个悲伤的事实——不管是什么茶，昆虫这件事谁也躲不过。用于评估各类昆虫生物多样性的eDNA方法
这样的研究结果可让科学家们乐坏了，没想到茶叶完美地留下了节肢动物的DNA碎片，这可能是由于茶叶加工过程中需要被磨碎，使得来自整个种植地区的DNA被混合在了一起。获取的大量数据甚至足够研究者重建过去35年来德国森林生态系统中昆虫群落的变化。
事实上，eDNA检测经过多年的发展，已经在各个领域大显神通。除了用于环境生物多样性调查，还能进行特定生物的调查。上述的茶包检测就是典型的环境生物多样性调查，在对特定生物调查上，eDNA也发挥了极大的作用。相比于“广撒网”“全覆盖”的环境生物多样性调查，对特定生物调查目标是寻找在环境样本中是否有目标（单一）物种的DNA存在，在样品处理上通常使用更精确的定量PCR(qPCR）技术，用于研究和追踪珍稀物种在自然界的分布。2018年4月12日，美国华盛顿州立大学研究人员在东南亚一些水域进行eDNA的检测，发现了极危动物斑鳖DNA的存在，认为它可能是全球范围内现存的第四只斑鳖，但也仅仅是发现其DNA，未见其真身。斑鳖
在随后首届的海洋环境DNA会议中，就有学者提出，在对濒危物种进行追踪监控或对海洋生物多样性进行调查时，不应该再使用传统的捕捞手段，而应该多尝试使用eDNA检测方法。以前水体中生物多样性调查多采用垂钓、拖网、潜水等方法，大家忙活一整天也就能捕捉到20多种不同的鱼类，但使用eDNA检测，可以在同一水域中检测超过100余个物种，检测样品仅仅需要取水即可，检测结果也更加科学可靠。通过对水域中eDNA进行检测即可获取鱼样信息
随着基因测序技术的发展，eDNA检测的效率越来越高，在检测成本降低后可以更多地应用于其他领域中，例如检测食用肉是否掺假，地理标志特色产品保护产品检测等等，相信以后该技术将会发挥越来越大的作用。只不过，喜欢喝茶的人以后就只能这么安慰自己——没关系，不就是点昆虫DNA嘛，猫屎咖啡还是……对吧？本文经授权转载自：蝌蚪五线谱（id:kedo2011)