作为生物体必需的营养元素之一，磷在物质代谢、信号传导和能量储存中起着关键作用。【目的】研究丝状真菌Podospora anserina中调控磷酸盐代谢相关转录因子的作用，可进一步阐明真核微生物中磷元素吸收的调控机制。【方法】利用同源重组的方法定点敲除P. anserina中2个磷代谢相关转录因子PaPho1和PaPho2，遗传杂交构建双重突变体ΔPaPho1ΔPaPho2；通过表型分析、无机磷含量测定和酸性磷酸酶活性测定分析各突变菌株的变化；利用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)分析磷代谢相关基因的表达情况。【结果】在无机磷作为唯一磷来源的培养基上，ΔPaPho1ΔPaPho2无法生长；在添加有机磷的培养基中，ΔPaPho1ΔPaPho2和野生型菌株生长无显著性差异。在同时添加有机磷和无机磷的培养基中，ΔPaPho1ΔPaPho2的无机磷含量和酸性磷酸酶活性比野生型菌株的分别下降了25.0%和61.9%，ΔPaPho1ΔPaPho2中无机磷酸盐转运蛋白基因的表达水平显著降低。【结论】在P. anserina中，PaPho1和PaPho2作为调控磷酸盐代谢信号通路转录因子，对无机磷的吸收起到关键作用，但并不参与有机磷的代谢调控。该研究可为阐释丝状真菌P. anserina对无机磷吸收的调控机制提供参考。