磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸降解产物促进小鼠单核细胞破骨向分化

摘要:

文题释义:

磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸共聚物:聚乳酸羟基乙酸是由乳酸和羟基乙酸聚合而成的高分子聚合物,具有可降解性、良好的生物相容性等优点,与磷酸钙骨水泥复合后,可加速磷酸钙骨水泥材料生物降解和新骨的形成速率。

金属基质蛋白酶9:属于锌金属蛋白酶家族,主要由中性粒细胞和巨噬细胞分泌,正常生理状态下处于低表达的状态,炎症、肿瘤刺激可使其分泌水平升高;激活后可降解细胞外基质,促进单核细胞、破骨前体细胞的迁移。

背景:前期研究发现磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸复合材料可加速骨改建过程,其降解产物对单核细胞破骨向分化的影响有待进一步研究。

目的:观察磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸降解产物对小鼠RAW264.7单核细胞破骨向分化的影响。

方法:实验分为空白对照组、羟基乙酸组、磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸组,按照实验分组,将配制好的溶液和50 μg/L核因子κB受体活化因子配体添加到完全培养基中制备成不同条件的培养基,培养小鼠RAW264.7细胞5 d,诱导其分化。应用CCK-8法分析各组培养液对细胞增殖作用的影响;RT-PCR和Western blot检测小鼠RAW264.7细胞破骨向分化相关因子活化T细胞核因子c1、基质金属蛋白酶9、核因子κB受体活化因子、抗酒石酸酸性磷酸酶基因和蛋白表达水平的变化;使用抗酒石酸酸性磷酸酶染色法鉴定破骨样细胞。

结果与结论:①CCK-8 结果显示,细胞在前72 h处于快速生长期,96 h后开始下降;②RT-PCR、Western blot 结果显示磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸组的活化T细胞核因子c1、核因子κB受体活化因子、抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA的表达水平及活化T细胞核因子c1、核因子κB受体活化因子的蛋白表达水平显著高于羟基乙酸组、对照组(P < 0.05);③羟基乙酸组和磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸组基质金属蛋白酶9 mRNA和蛋白的表达水平差异无显著性意义,但高于对照组(P < 0.01);④抗酒石酸酸性磷酸酶染色可见磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸组破骨样细胞数高于对照组和羟基乙酸组,差异有显著性意义(P < 0.05);⑤结果表明磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸组降解产物形成的微环境可促进小鼠RAW264.7细胞破骨向分化。

缩略语:聚乳酸羟基乙酸:poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA;磷酸钙骨水泥:calcium phosphate cement,CPC;活化T细胞核因子c1:nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1,NFATc1

https://orcid.org/0000-0001-6572-5748 (龙桂月);https://orcid.org/0000-0001-8638-5666(廖红兵)

中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程

关键词: 磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸, 单核细胞, 破骨分化, 基质金属蛋白酶9, 活化T细胞核因子c1, 核因子κB受体活化因子

引用本文: 龙桂月, 李冬冬, 廖红兵. 磷酸钙骨水泥/聚乳酸羟基乙酸降解产物促进小鼠单核细胞破骨向分化[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(8): 1193-1198.

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