2004年世界第一个商品化UPLC产品的Waters ACQUITY UPLC 超高效液相色谱系统问世。UPLC从HPLC出发，借助于HPLC的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。
超高效液相色谱是HPLC的后继技术，它的分析效率与HPLC相似，但操作压力要高得多。与HPLC柱中的颗粒(< 6000 psi)相比，UPLC可以承受 9000 psi或更高的系统压力，以获得高流速。大多数高效液相色谱柱的颗粒大小在2.5到5μm之间。而UPLC色谱柱是低于2μm多孔颗粒。由于颗粒尺寸小，固定相与分析物之间的扩散路径更短，效率更高。相比HPLC，UPLC拥有着：高分离度、高速度，省时、省费、省人工，适合复杂体系如复方制剂，弥补HPLC方法不足等优势。
2016年3月，美国药典（USP）全面认可了UPLC技术，在USP 39版本中收录了57个品种药物的UPLC检测方法，从法规层面为全球应用UPLC技术的广大制药企业提供了明确的使用指导原则。现阶段大多数药物检测标准延用HPLC方法，如何对现有HPLC方法进行升级，将现有的HPLC方法顺利转到UPLC平台，引起了热烈的探讨。
通用的将HPLC 方法转换为UPLC 方法有以下三个步骤：
选择与药典方法指定色谱柱相当的HPLC色谱柱，并运行药典中具体品种的各论方法
使用方法转换公式将HPLC方法转换为UPLC方法
按照药典要求，对转化后的UPLC方法进行评价
HPLC色谱柱选择
选择等效的色谱柱成为转换的首要条件，这也是方法转换的难点之一。《中国药典》并未对色谱柱做出详细指示，为了准确选择与药典各论中指定的色谱柱类型性能相当的色谱柱，如果药典各论方法中没有规定色谱柱的具体品牌和规格，一般需要进行色谱柱的筛选实验，以便选出一款符合药典方法要求的色谱柱，通常情况下，这是一个比较耗时的工作。
HPLC/UPLC方法转换
针对两者的差异进行转换研究:色谱柱填料粒径不同、系统体积不同、仪器输送流动相系统内径不同，将会影响到流速、进样量、梯度洗脱程序，因此需要对这三个参数进行调整。
1. 流速的改变
流速主要是指流动相在色谱柱中的线速度，与色谱柱内径dc有关，流速的计算公式为：
目标流速=（原方法流速*目标柱内径²*原粒径）/原色谱柱内径²/现粒径
流速的调整需要注意不改变线速度
2. 进样量的改变
由于UPLC上使用的色谱柱柱体积一般比普通HPLC上小很多，所以载样量也会有所降低，如果这时不减小进样量，有可能造成样品过载或溶剂效应。而进样量与柱体积成正相关。
目标进样体积=原方法进样体积*目标柱体积/原色谱柱体积
进样量的改变需要注意不改变供试液的浓度
3. 梯度洗脱程序转换
梯度洗脱需调整梯度洗脱程序。
通常色谱仪器均配备转换软件，输入原始洗脱程序，软件可自动计算并转换为目标仪器的洗脱程序。
当然，UPLC/HPLC的转换还有着更多的奥秘，不同的变量都对方法转移有着不同程度的影响，为了更加深入的探究，药融圈联合沃特世共同邀请到南京药石科技股份有限公司 CMC分析部分析总监张明以及沃特世科技（上海）有限公司大中华区资深应用工程师楚朋飞，在2023年3月27日药融云端直播间，共同探讨分析UPLC的使用策略，希冀能在HPLC/UPLC方法转移时提供助力。